Introducción: El virus de la necrosis pancreática infecciosa (IPNV) es un patógeno de gran impacto para la industria salmonera, con altas tasas de mortalidad, que pueden alcanzar hasta el 90% en los estadios juveniles Fry y Parr, generando pérdidas económicas significativas en este clúster de gran importancia económica para Chile. IPNV, es un virus icosaédrico desnudo, perteneciente a la familia Birnaviridae y al género Aquabirnaviridae. Se ha descrito que la principal proteína de la cápside viral, VP2, posee un rol clave en la modulación de la respuesta inmune del hospedero ya que, entre otros aspectos, posee marcadores moleculares asociados a virulencia. En este contexto, el presente estudio tiene como objetivo comparar el efecto de la infección con IPNV y la sobreexpresión de la proteína viral VP2 sobre el perfil de expresión de IFN1 y IFNγ2, IL-10, TGF-β e IL-1β, en dos líneas celulares de tejido inmunológico, RTS11 (Oncorhynchus mykiss) y SHK-1 (Salmo salar).
Metodología: Las líneas celulares SHK-1 y RTS11 fueron infectadas con dos aislados virales, 1096-BC1 y 1096-BC2, genogrupos 1 (Wb) y 5 (Sp), respectivamente. Se clono la secuencia codificante para VP2 de cada aislado en el vector pcDNA3.1(+), estas construcciones fueron transfectadas por separado en ambas líneas celulares, utilizando Lipofectamina 3000 (Invitrogen). Se cuantificó la expresión transcripcional de VP2 y de los genes de interés mediante RT-qPCR. Se incluyeron los respectivos controles.
Resultados: Se obtuvieron patrones de expresión diferenciales entre las líneas celulares RTS11 y SHK-1, entre las condiciones de infección con cada aislado de IPNV y la sobreexpresión de VP2 de cada aislado. Se observaron diferencias significativas en los niveles de expresión de los genes de las citoquinas de interés respecto a sus controles correspondientes.
Discusión: Las líneas celulares RTS11 y SHK-1, infectadas con ambos aislados de IPNV, mostraron diferencias en los patrones de expresión de las citoquinas IL-1β, IL-10, TGFβ, IFN1 e IFNγ2, lo cual sugiere una capacidad distinta de cada aislado para modular la respuesta inmune del hospedero. Por otro lado, la comparación de estos perfiles de expresión con los obtenidos en las líneas celulares transfectadas con VP2 de cada aislado aporta evidencias sobre el posible rol de esta proteína estructural en la regulación diferencial de la respuesta inmune inducida por los aislados de IPNV.
Financiamiento: Centro Interdisciplinario para la Investigación Acuícola, INCAR (Proyectos FONDAP 1522A0004 y FONDAP-ANID 1523A0007), Proyecto FONDECYT 1241788.