Latin American & Caribbean Aquaculture 2019

November 19 - 22, 2019

San Jose, Costa Rica

ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO EN EL CULTIVO DE LA TILAPIA Oreochromis spp. EN EL ESTADO DE SINALOA, MÉXICO Y USO DE HERRAMIENTAS NGS PARA LA CARACTERIZACIÓN GENÓMICA DE CEPAS BACTERIANAS RECOBRADAS EN GRANJAS ACUÍCOLAS

María Elena Báez Flores*, Antonio Magaña Lizárraga ,  Antonio Valenzuela Armenta,  Bruno Gómez Gil, Sylvia Páz Díaz Camacho, Guadalupe Rendón Maldonado , Inés Fernando Vega López, Rogelio Prieto Alvarado, Martina Hilda Gracia Valenzuela, Fr ancisco Delgado Vargas.
 
 Unidad de Investigaciones en Salud Pública "Dra. Kaethe Willms ", Facultad de Ciencias Químico Biológicas, Universidad Autónoma de Sinaloa,  Av. De Las Américas Esq. Josefa Ortiz de Domínguez S/N. Ciudad Universitaria, Culiacán Rosales, Sinaloa. elenabf@uas.edu.mx
 

La tilapia (Oreochromis spp. ) es una de las principales especies piscícolas cultivadas en  el  mundo. México  produce 80,000 toneladas al año y Sinaloa es  el sexto productor nacional. La tilapia crece en diferentes ambientes (agua dulce, salada y salobre ) por lo que es  susceptible al ataque por diversos microorganismos que afectan su desarrollo y causan enfermedades, algunas transmisibles al humano. El objetivo de este  trabajo fue estimar la prevalencia de bacterias patógenas para el hombre y/o tilapia (Oreochromis spp.), en tilapia  y agua de estanque en granjas acuícolas de Sinaloa ,  México, así como estudiar las características genómicas de Escherichia coli ACM5 recobrada de tilapia. Se investigó la presencia de mesófilos aerobios (MA) , coliformes totales (CT), coliformes fecales (CF), E. coli , Staphylococcus aureus , y Streptococcus spp. en 61 muestras de masa muscular de tilapia (Oreochromis spp.) y 65 muestras de agua proveniente de 29 granjas de Sinaloa. Se utilizaron placas Petrifilm 3M para la determinación de CT, CF, MA y S. aureus ;  la presencia de  E. coli ,  y Streptococcus spp. , se investigó uti lizando agar McConkey y agar Sangre. La identificación bacteriana se realizó mediante pruebas bioquímicas convencionales y el sistema Vitek (Biomériux). La secuenciación se realizó en  la plataforma Illumina MiniSeq .  El ensamble  de novo se realizó con SPAdes y A5; los contigs obtenidos se concatenaron  con Mix y para obtener los scaffolds  se utilizó  el servidor MEDUSA  y  el genoma de E . coli AMSHJX01 (CP030939 - Genebank accesión) como referencia. La anotación se  realizó  con Prokka v1.14. Para l a tipificación  in silico se  utilizaron  las herramientas SerotypeFinder v2.0, MLST v2.0, ResFinder v3.2 y VirulenceFider v2.0 para determina r  el serotipo,  el tipo de secuencia  ST,  los determinantes de resistencia a antibióticos adquiridos, y de virulencia, respectivamente.  Se detectaron MA en el 89% de las muestras, con un promedio de 1.58 x 106 UFC/mL ; CT en el 64% de las muestras con un promedio de 2.4 x 104 UFC/mL y CF en el 48% de las muestras con un promedio de 3.84 x 102 UFC/mL . Por otra parte S. aureus se detectó en 2 muestras a una concentración de 3.0 x 101 UFC/mL . Las bacterias más prevalentes fueron Escherichia coli (48) y Enterobacter agglomerans  (21).  El genoma de  E. coli ACM5 fue ensamblado en 27 scaffolds , con una longitud total de 5, 262,724 pb y contenido G+C de 50.45%.  Se identificaron 5,391 genes, 5,075 CDS (1,362 proteínas hipotéticas), 10 ARNr, 89 ARNt y 216 ARNnc . Por otra parte, la tipificación  in silico sugiere que  E. coli ACM5 expresa un serotipo O-H: 21 y pertenece al grupo clonal ST40  según  el esquema de tipificación de Achtman. En cuanto a resistencia a antimicrobianos, se identificó la secuencia del gen mdf(A) , codi ficante para un sistema de eflujo de múltiples drogas. Sorprendentemente, se identificaron las secuencias d e los genes astA e iss que codifican la enterotoxina termo-estable EAST-1 y la proteína Iss , respectivamente. La toxina EAST-1 fue descrita  primeramente  en el patotipo EAEC, mientras que Iss fue identificada en un aislado obtenido de septicemia y está relacionada con el incremento en la resistencia al c omplemento sérico. Lo anterior  evidencia el potencial patogénico que este aislado de  E. coli proveniente de peces de una granja acuícola posee y el posible riesgo para la salud en caso de consumo de productos crudos por personas inmunocomprometidas  Palabras clave:  acuacultura, Oreochromis,  E. coli , NGS, coliformes fecales .