Latin American & Caribbean Aquaculture 2019

November 19 - 22, 2019

San Jose, Costa Rica

FACTORES INVOLUCRADOS EN LA ACTIVACIÓN Y REGULACIÓN DE LOS FACTORES INVOLUCRADOS EN LA FAGOCITOSIS EN Macrobrachiun tenellum

Dulce Mateos*, Juan Alpuche.
Laboratorio de Investigaciones Multisciplinarias, Centro de Investigación Facultad de Medicina UNAM-UABJO. FMyC, Universidad Autónoma "Benito Juárez" de Oaxaca. Oaxaca de Juárez, Oaxaca CP68026, email: Juan_alpuche@hotmail.com
 

En Macrobrachium tenellum actualmente existen estudios sobre su inmunidad y se ha enfocado en los mecanismos básicos que utiliza para combatir las enfermedades que los afectan, sin embargo, a pesar de esta información las rutas bioquímicas, los mecanismos de regulación y las moléculas especializadas en su inmunidad permanecen desconocidas.

Se colectaron organismos de M. tenellum en muestreos periódicos en la región de la Costa de Oaxaca; los animales fueron mantenidos en condiciones de cautiverio, la hemolinfa fue extraída por punción en la base del primer segmento abdominal utilizando anticoagulante, posteriormente se hizo lisado celular mediante choque térmico; se determinó la concentración total de proteínas con el Kit BCA, seguido de electroforesis SDS-PAGE,  también se hizo conteo celular, citometria de flujo y por último se hicieron ensayos de fagocitosis y estallido respiratorio usando diferentes inmunoestimuladores.

La concentración de proteína promedio de la hemolinfa es de 2.030 mg/ml y la concentración promedio de proteína en la hemolinfa inmunoestimulada es de 2.030 mg/mL; en el perfil electroforético de la hemolinfa, la banda proteica con mayor abundancia fue Hemociania con un peso de 75 kDa y en el perfil electroforético de la hemolinfa inmunoestimulada se expresaron bandas proteicas de 150, 130, 68, 38 y 28 kDa. Se obtuvo un total de 217,500 células/ml presentes en la hemolinfa y 128, 500 células/ml en la hemolinfa  inmunoestimulada; en citometria de flujo se observaron 3 poblaciones distintas de Hemocitos, en la hemolinfa se encontró mayor presencia de Hemocitos Hialinos y poca presencia de Hemocitos Semigranulares y Granulares, en la hemolinfa inmunoestimulada la población de Hemocitos Hialinos disminuye pero aumenta la población de Hemocitos Semigranulares y Granulares., en estallido respiratorio se observó que Zymozan es el inmunoestimulador con mayor reconocimiento y la fagocitosis se realiza en 10 minutos, en donde los hemocitos llevan a cabo diferentes pasos.

La inmunidad en M.tenellum está basada por hemocitos siendo los hemocitos semigranulares y granulares los responsables de realizar la fagocitosis. La concentración de proteína aumenta durante la fagocitosis y la concentración total de Hemocitos disminuye cuando son inducidos a estímulos, la actividad fagocítica tiene un mayor reconocimiento hacia patógenos de origen fúngico, seguido de un reconocimiento de patógenos de origen bacteriano. Los pasos de la fagocitosis que realizan los hemocitos son: infección, reconocimiento de la partícula, endocitosis y exocitosis.