Latin American & Caribbean Aquaculture 2019

November 19 - 22, 2019

San Jose, Costa Rica

CRIOCONSERVACIÓN SEMINAL DE CACHAMA BLANCA Piaractus brachypomus: CAMBIOS EN ULTRAESTRUCTURA ESPERMÁTICA A LARGO TÉRMINO

 Víctor M. Medina-Robles1*, José D. Cárdenas-Bernal1, Felipe Millán-Bohórquez1 , Diana N. Guaje-Ramírez1 ,  Edwin Gómez-Ramírez2 ,  Pablo E. Cruz-Casallas1
1 Grupo de Investigación sobre Reproducción y Toxicología de Organismos Acuáticos - GRITOX, Instituto de Acuicultura de los Llanos - IALL, Facultad de Ciencias Agropecuarias y Recursos Naturales, Universidad de los Llanos, Villavicencio, Meta - Colombia . 2 Grupo de Ecotoxicología, Evolución, Medio Ambiente y Conservación (E=mc2), Facultad de Ciencias Básicas y Aplicadas, Universidad Militar Nueva Granada, Cajica, Cundinamarca - Colombia
*Autor de correspondencia : vmmedinarobles@unillanos.edu.co

Agradecimientos: El presente trabajo es apoyado por el Fondo Social de Educación Superior de la Gobernación del Meta a través de la beca de doctorado otorgada al autor Víctor Mauricio Medina-Robles.

La cachama blanca (Piaractus brachypomus Cuvier 1818) es una especie nativa de las cuencas de los ríos Orinoco y Amazonas, co n gran importancia económica para Colombia, Brasil, Perú,  Venezuela y América Central. En la actualidad varios protocolos de crioconservación seminal han sido establecidos en la especie, sin embargo , se desconoce  los posibles cambios a nivel de morfología celular que puedan darse por el proceso de conservación en nitrógeno líquido (NL)  a largo término. El objetivo del presente trabajo fue establecer posibles cambios a nivel de ultraestructura espermática en semen crioconservado de cachama blanca y determinar la capacidad de fertilización del mismo. F ueron utilizados seis (n=6) machos maduros (4.2±0.1 kg), inducidos a la espermiación con Extracto de Pituitaria de Carpa (4 mg.kg-1 de peso vivo), el semen obtenido de forma individual fue mezclado  con un diluyente compuesto por 12 % de dimetilsulfoxido, 5.5% glucosa y 12 % de yema de huevo en relación 1:4 (semen:diluyente) , empacado en pajillas de 5 mL y congelados en vapores de NL por medio de un tanque dry shipper durante 30 minutos y posteriormente sumergidos en NL. El semen fue descongelado en baño de agua a 35°C por 60 seg y evaluado a las 24 horas , 1, 6 y 12 meses para observar efectos sobre  la morfología ultraestructura l a través de microscopia electrónica de transmisión. La fertilidad fue realizada utilizando oocitos de una misma hembra y teniendo como control semen fresco (SF) .  Los espermatozoides de cachama blanca presentan una cabeza sin acrosoma , un único flagelo (monoflagelados ) y mitocondrias.  Tanto en el SF como crioconservado se observó un flagelo con un punto de inserción hacia la región rostro-medial de la cabeza, con arreglos centriolares proximales y distales. En los cortes transversales el flagelo mostró arreglos centriolares con una organización de microtúbulos en el axonema de 9+2, y en cortes longitudinales parecen ser continuas sin diferencias intratubulares. El flagelo está inserto en la cabeza por una marcada evaginación. La pieza media es cilíndrica rodeada de un canal citoplasmático con alrededor de 8 mitocondrias por espermatozoide. Las mitocondrias son esféricas con crestas bien definidas. El núcleo presentó  abundante material electrodenso homogéneamente distribuido, cubierto por una envoltura nuclear con dos membranas plasmáticas.  Solo en el  tratamiento de 12 m de crioconservación se observaron algunas anormalidades ultraestructurales como fue el aumento de espesor de la membrana plasmática y ruptura de la misma, con rugosidades en la cabeza del flagelo y sin continuidad membranal. El núcleo exhibió material genético menos electrodenso. Las mitocondrias estuvieron en menor cantidad presentando daños en las crestas mitocondriales y en la membrana plasmática. Se observaron desarreglos en las piezas medias y en algunos casos desacoplamiento del flagelo. La motilidad espermática en el semen crioconservado no disminuyó significativamente durante los periodos de almacenamiento siendo menor al mes 12 (50±2,8%). De igual forma, la fertilidad del semen crioconservado (74,2±1,5%) aun cuando fue menor significativamente (p<0,05) con el SF mostró un porcentaje alto. En conclusión, semen crioconservado de cachama blanca a largo término mantienen su capacidad de fertilización aun cuando son observados algunos cambios ultraestructurales.